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https://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/33882
| Título : | Two-step accelerating freezing protocol yields a better motility, membranes and DNA integrities of thawed ram sperm than three-steps freezing protocols |
| Autor: | Galarza Lucero, Diego Andres
López Sebastián, Antonio
Woelders, Henri
Blesbois, Elizabeth
Santiago Moreno, Julián |
| Correspondencia: | Galarza Lucero, Diego Andres, dgalarza@ucm.es |
| Palabras clave : | Ram
Semen cryopreservation
Cooling
Semen quality
DNA integrity |
| Área de conocimiento FRASCATI amplio: | 4. Ciencias Agrícolas |
| Área de conocimiento FRASCATI específico: | 4.3 Medicina Veterinaria |
| Área de conocimiento UNESCO amplio: | 08 - Agricultura, Silvicultura, Pesca y Veterinaria |
| ÁArea de conocimiento UNESCO detallado: | 0841 - Veterinaria |
| Área de conocimiento UNESCO específico: | 084 - Veterinaria |
| Fecha de publicación : | 2019 |
| Volumen: | volumen 91 |
| Fuente: | Cryobiology |
| metadata.dc.identifier.doi: | 10.1016/j.cryobiol.2019.10.007 |
| Tipo: | ARTÍCULO |
| Abstract: | The present study compares a protocol that mimics freezing of ram semen in static nitrogen vapor with two protocols with an initial low cooling rate in the first step, followed by higher cooling rates where ice nucleation occurs. Semen ejaculates, obtained from twelve adults rams, were diluted with TEST-based extender and frozen with either Protocol 1 (three-step decelerating cooling): from +5 ºC to -35 ºC (40 ºC/min), from -35 ºC to -65 ºC (17 ºC/min), and then from -65 ºC to -85 ºC (3 ºC/min); or Protocol 2 (three-step accelerating cooling): from +5 ºC to -5 ºC (4 ºC/min), from -5 ºC to -110 ºC (25 ºC/min), and then from -110 ºC to -140 ºC (35 ºC/min); or Protocol 3 (two-step accelerating cooling), from +5 ºC to -10 ºC (5 ºC/min), and then from -10 ºC to -130 ºC (60 ºC/min). Post-thaw sperm quality was reduced for all protocols (p < .05) compared with fresh semen. Post-thaw percentages of sperm motility characteristics and sperm with intact plasma membrane, intact acrosome, and intact mitochondrial membrane were greater using Protocol 3 than Protocol 2 (p < .05) and Protocol 1 (p < .01). In addition, the post-thaw percentage of sperm with fragmented DNA was lower (p < .05) using Protocol 3 compared with Protocol 1. The present results indicate that a cooling rate of 60 ºC/min around and after the time point of ice nucleation provided better post thaw survival and function of ram sperm than lower (and/or decelerating) cooling rates |
| Resumen : | El presente estudio compara un protocolo que imita la congelación del semen de ram en vapor de nitrógeno estático con dos protocolos con una velocidad de enfriamiento baja inicial en el primer paso, seguido de velocidades de enfriamiento más altas donde ocurre la nucleación de hielo. Los eyaculados de semen, obtenidos de doce carneros adultos, se diluyeron con un extensor basado en TEST y se congelaron con el Protocolo 1 (enfriamiento de desaceleración en tres pasos): de +5 ºC a -35 ºC (40 ºC / min), de -35 ºC a -65 ºC (17 ºC / min), y luego de -65 ºC a -85 ºC (3 ºC / min); o Protocolo 2 (enfriamiento acelerado en tres pasos): de +5 ºC a -5 ºC (4 ºC / min), de -5 ºC a -110 ºC (25 ºC / min), y luego de -110 ºC a -140 ºC (35 ºC / min); o Protocolo 3 (enfriamiento acelerado en dos etapas), de +5 ºC a -10 ºC (5 ºC / min), y luego de -10 ºC a -130 ºC (60 ºC / min). La calidad del esperma después de la descongelación se redujo para todos los protocolos (p <.05) en comparación con el semen fresco. Los porcentajes posteriores a la descongelación de las características de movilidad de los espermatozoides y los espermatozoides con membrana plasmática intacta, acrosoma intacto y membrana mitocondrial intacta fueron mayores utilizando el Protocolo 3 que el Protocolo 2 (p <.05) y el Protocolo 1 (p <.01). Además, el porcentaje de esperma después del descongelamiento con ADN fragmentado fue menor (p <.05) usando el Protocolo 3 en comparación con el Protocolo 1. Los resultados actuales indican que una velocidad de enfriamiento de 60 ºC / min alrededor y después del punto de tiempo del hielo la nucleación proporcionó una mejor supervivencia después de la descongelación y la función de los espermatozoides de ram que las tasas de enfriamiento más bajas (y / o desaceleración) |
| URI : | https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2019.10.007 |
| URI Fuente: | https://www.sciencedirect.com/journal/cryobiology |
| ISSN : | 0011-2240 |
| Aparece en las colecciones: | Artículos
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